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维立西呱通过调控 circPRKCI 表达对脂多糖致大鼠心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响 |
华崇俊 华秀红 黄春艳 潘轶斌 |
浙江大学医学院附属金华医院(金华市中心医院)心内科 |
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摘要 目的 探讨维立西呱对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响以及其对环状 RNA PRKCI(circPRKCI)表达的调控机制。 方法 取大鼠心肌细胞 H9C2,采用 LPS 诱导方式构建心肌细胞损伤模型;按随机数字表法分为对照组、LPS 组、LPS+ 维立西呱 -L 组(1 滋mol/L)、LPS+ 维立西呱 -M 组(3 滋mol/L)、LPS+ 维立西呱 -H 组(10 滋mol/L)、LPS+ 空载体质粒(pcDNA)组、LPS+circPRKCI 过表达载体(pcDNA-circPRKCI)组、LPS+ 维立西呱 -H+ 阴性对照(sh-NC)组、LPS+ 维立西呱 -H+circPRKCI 慢病毒短发夹 RNA(sh-circPRKCI)组。检测并比较各组 H9C2 细胞肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、白细胞介素 6(IL-6)等炎症因子水平,细胞凋亡率和裂解的胱天蛋白酶(Cleaved Caspase)-3、CleavedCaspase-9 等凋亡相关蛋白表达水平,以及 circPRKCI mRNA 表达水平。 结果 与对照组比较,LPS 组 TNF-α 水平、IL-6 水平、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白 Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋白表达水平均明显升高(均 P<0.05);与 LPS 组比较,LPS+ 维立西呱 -L 组、LPS+ 维立西呱 -M 组、LPS+ 维立西呱 -H 组上述指标均明显降低(均 P<0.05),且LPS+ 维立西呱 -L 组>LPS+ 维立西呱 -M 组>LPS+ 维立西呱 -H 组 (均 P<0.05)。与对照组比较,LPS 组 circPRKCImRNA 表达水平明显降低(P<0.05);与 LPS 组比较,LPS+ 维立西呱 -L 组、LPS+ 维立西呱 -M 组、LPS+ 维立西呱 -H 组circPRKCI mRNA 表达水平均明显升高(均 P<0.05),且 LPS+ 维立西呱 -L 组<LPS+ 维立西呱 -M 组<LPS+ 维立西呱 -H组(均 P<0.05)。与 LPS+pcDNA 组比较,LPS+pcDNA-circPRKCI 组 circPRKCI mRNA 表达水平明显升高(P<0.05),而TNF-α 水平、IL-6 水平、细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白 Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋白表达水平均明显降低(均 P<0.05)。与 LPS+ 维立西呱 -H+sh-NC 组比较,LPS+ 维立西呱 -H+sh-circPRKCI 组 circPRKCI mRNA 表达水平明显降低(P<0.05),而 TNF-α 水平、IL-6 水平、细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白 Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋白表达水平均明显升高(均 P<0.05)。 结论 维立西呱可抑制 LPS 诱导的大鼠心肌细胞炎症反应和细胞凋亡,其作用机制是上调 circPRKCI mRNA 表达。
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