调控自噬对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

论著

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调控自噬对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

单培仁,余灵芳,黄周青,黄伟剑

325000,温州医科大学附属第一医院心内科%温州医科大学附属育英儿童医院肾内科

The Effects of Regulation of Autophagy on H9c2 Cardiomyocytes Exposed to Hypoxia/Reoxygenation Injury

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摘要目的探讨调控自噬水平对H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响及意义。方法将H9c2心肌细胞缺氧2h/复氧4h，建立H/R损伤模型。以3-甲基腺嘌呤(3- MA)为自噬特异抑制剂和雷帕霉素为自噬增强剂，试验随机分为四组：正常对照组（C组）、H/R组、H/R+100 mol/L 3- MA组（M+H/R组）、H/R+100 nmol/L雷帕霉素（R+H/R组），应用MTT法检测细胞活力，透射电镜检测心肌细胞自噬小体，流式细胞技术检测细胞凋亡比例，Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及下游活性片段Caspase-9、Caspase-3蛋白表达。结果 H/R组明显诱导H9c2心肌细胞自噬发生、细胞活力下降、凋亡增加（P＜0.01），Western blot检测发现，Bax、Caspase-9、Caspase-3活性片段蛋白表达明显增加，Bcl-2表达明显抑制，Bax/Bcl-2比值、活化蛋白Caspase-3、Caspase-9表达增加（P＜0.01）；M+H/R组H/R损伤作用明显减弱，线粒体凋亡通路及下游蛋白表达抑制（P＜0.01）；而R+H/R组线粒体凋亡通路进一步激活，促进细胞凋亡发生（P＜0.01）。结论自噬在H9c2心肌细胞H/R损伤中起到致命性作用，抑制自噬可保护心肌细胞H/R氧化应激损伤，其机制与抑制线粒体凋亡通路有关。

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通讯作者: 单培仁

引用本文:

单培仁,余灵芳,黄周青,黄伟剑. 调控自噬对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响[J]. , 2013, 32(6): 473-477.

链接本文:

http://www.xdyxh.com/CN/ 或 http://www.xdyxh.com/CN/Y2013/V32/I6/473