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| 基于网络药理学、分子对接及细胞实验探讨 DHA 抗室性心律失常的潜在机制 |
| 黄晓燕 |
| 宁波市医疗中心李惠利医院医工融合创新研究院 |
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摘要 目的 运用网络药理学、分子对接及细胞实验探讨二十二碳六烯酸(DHA)抗室性心律失常(VA)的潜在机制。
方法 通过 PubChem 和 Swiss Target Prediction 数据库获取 DHA 靶点,通过 DisGeNET 和 OMIM 数据库获取 VA 靶点;通
过 STRING 平台构建两者交集靶点的蛋白相互作用(PPI)网络,通过 DAVID 数据库对交集靶点进行基因本体论(GO)、京都基
因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,使用 Autodock Vina 和 Pymol 软件进行分子对接。取 AC16 细胞并分为对照组、双氧
水(H2O2)组(1 000 滋mol/L H2O2 预处理 4 h)、H2O2+DHA 组(1 000 滋mol/L H2O2 预处理 4 h 后再加入 10 滋mol/L DHA 干预 24 h),
采用 2',7'- 二氟荧光素双醋酸酯探针法检测各组细胞内活性氧(ROS)相对含量;另取 AC16 细胞并分为对照组、DHA 组
(10 滋mol/L DHA 干预 24 h),采用免疫荧光细胞化学染色法检测各组丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1 蛋白相对表达量。
结果 共获得 DHA 与 VA 交集靶点 9 个。PPI 网络显示 MAPK1 与其他蛋白相互作用最强。GO 富集分析显示 DHA 抗 VA 涉
及心肌舒张负调控等 45 个生物学过程、MAPK 活性等 14 个分子功能以及电压门控钙通道复合体等 7 个细胞成分;KEGG 富
集分析筛选得到糖尿病并发症的晚期糖基化终末产物 - 晚期糖基化终末产物受体信号通路等 23 条通路。分子对接显示 DHA
与 MAPK1 的结合能为 -5.1 kcal/mol。与 H2O2 组比较,H2O2+DHA 组细胞内 ROS 相对含量减少(P<0.05)。与对照组比较,
DHA 组细胞内 MAPK1 蛋白相对表达量降低(P=0.001)。 结论 DHA 可通过 MAPK1 等多靶点、多通路干预,进而调控心肌
离子通道活性和抗氧化应激反应来发挥抗 VA 作用。
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| 基金资助:浙江省医药卫生科技计划项目(2023KY240);浙江省中医药科技计划项目(2023ZL656) |
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