葡萄糖调节蛋白78在心肌梗死后纤维化中的作用及机制研究

doi:10.12124/j.issn.2095-3933.2024.6.2024-5881

心电与循环

2024, Vol. 43

Issue (06): 579-583,588 DOI: 10.12124/j.issn.2095-3933.2024.6.2024-5881

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葡萄糖调节蛋白78在心肌梗死后纤维化中的作用及机制研究

袁航楼钶楠林玉平

宁波市医疗中心李惠利医院电生理科

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摘要目的探究葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在心肌梗死后纤维化中的作用及机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠12只，分为观察组和对照组，各6只。观察组结扎冠脉左前降支建立急性心肌梗死小鼠模型。使用苏木精伊红染色试剂盒和马松三色染色试剂盒检测心肌纤维化区域。使用蛋白免疫印迹（WB）法检测心肌组织中GRP78、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK）、磷酸化真核启动因子2α蛋白（p-eIF2α）和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）相对蛋白表达量。提取心脏成纤维细胞，将心脏成纤维细胞分为血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组、AngⅡ组+阴性对照物（sh-NC）组、AngⅡ组+抗GRP78短发夹RNA（sh-GRP78）组、AngⅡ组+sh-GRP78+衣霉素（Tn）组及对照组。使用细胞计数试剂盒8评估心肌成纤维细胞活性。使用划痕愈合实验检测心肌成纤维细胞迁移能力。使用WB法检测心肌成纤维细胞I型胶原蛋白（CollagenⅠ）、Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、GRP78、p-PERK、p-eIF2α和CHOP相对蛋白表达量。结果与对照组比较，观察组小鼠心脏组织出现明显损伤及明显纤维化，GRP78、p-PERK、p-eIF2α和CHOP相对蛋白表达量较高（均P＜0.001）。在体外细胞模型中，与对照组比较，AngⅡ组心脏成纤维细胞活性较强，迁移能力较强，CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、GRP78、p-PERK、p-eIF2α和CHOP相对蛋白表达量较高（均P＜0.05）。与AngⅡ+sh-NC组比较，AngⅡ+sh-GRP78组细胞活性较低，迁移能力较低，CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、GRP78、p-PERK、p-eIF2α和CHOP相对蛋白表达量较低（均P＜0.05）。与AngⅡ+sh-GRP78组比较，AngⅡ+sh-GRP78+Tn组活性较强，迁移能力较强，CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、GRP78、p-PERK、p-eIF2α和CHOP相对蛋白表达量较高（均P＜0.05）。结论GRP78可以通过激活内质网应激来调节心肌梗死诱导的心肌纤维化中的成纤维细胞活性、迁移能力和纤维化进展。

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基金资助:浙江省医药卫生科技计划项目（2023KY1029）

引用本文:

袁航楼钶楠林玉平. 葡萄糖调节蛋白78在心肌梗死后纤维化中的作用及机制研究[J]. 心电与循环, 2024, 43(06): 579-583,588.

链接本文:

http://www.xdyxh.com/CN/10.12124/j.issn.2095-3933.2024.6.2024-5881 或 http://www.xdyxh.com/CN/Y2024/V43/I06/579