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| 丹参酮ⅡA上调miR-124靶向
SGK1调控自噬的抗胶质瘤作用
机制研究 |
| 王青霞 汪滨 |
| 杭州市萧山区中医院药剂科（王青霞），神经外科（汪滨） |
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摘要 质瘤作用机制。方法 选取人胶质瘤细胞U251和T98G，观察T2A干预48h后对细胞增殖、凋亡、自噬和miR-124表达
的影响；使用3-甲基腺嘌呤（3-MA）抑制U251细胞自噬，进一步观察自噬抑制对T2A调控U251细胞生物学效应的影响。通
过慢病毒技术构建稳定低表达SGK1的U251细胞，转染miR-124抑制剂（inhibitor）24h后加入T2A干预48h，观察
miR-124抑制对T2A处理胶质瘤细胞后miR-124、SGK1表达及自噬的影响以及沉默SGK1对上述U251细胞生物学效应的
影响。采用双荧光素酶报告基因检测法检测miR-124与SGK1的靶向关系。通过构建异种移植瘤小鼠模型[注射正常U251细
胞以及经携带inhibitor阴性对照（NC）、miR-124inhibitor的慢病毒感染过的U251细胞]体内验证T2A上调miR-124靶向
SGK1调控自噬的抗胶质瘤作用。结果 在U251和T98G细胞中，T2A可抑制细胞增殖，促进细胞凋亡和自噬，上调
miR-124表达水平以及微管相关蛋白1轻链3（LC3B）-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平，差异均有统计学意义（均P＜
茁
0.01）。在U251细胞中，与T2A组比较，T2A+3-MA组EdU阳性细胞数量较多，细胞凋亡率以及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、
Beclin-1蛋白表达水平均较低（均P＜0.01）；与T2A+inhibitorNC组比较，T2A+miR-124inhibitor组miR-124表达水平以及
LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平均较低（均P＜0.05），SGK1蛋白表达水平较高（P＜0.05）；与T2A+miR-124
inhibitor+短发夹RNA（sh）-NC组比较，T2A+miR-124inhibitor+sh-SGK1组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平
均较高（均P＜0.05），SGK1蛋白表达水平较低（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因检测显示，miR-124可直接靶向结合SGK1的
3'-非翻译区，miR-124+SGK1突变型组相对荧光素酶活性高于miR-124+SGK1野生型组（P=0.008）。异种移植瘤小鼠实验
验证T2A腹腔注射8周（3次/周）后能减小肿瘤体积和重量，下调SGK1蛋白表达，上调miR-124表达及LC3B-Ⅱ/LC3B-
Ⅰ、Beclin-1蛋白表达，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；T2A+miR-124inhibitor干预可逆转T2A的上述调控效应（均P＜
0.05）。结论 T2A可上调miR-124进而靶向抑制SGK1诱导胶质瘤细胞发生自噬，从而发挥抗肿瘤作用。
[关键词]丹参酮ⅡA；miR-124；血清/糖皮质激素调节激酶1；自噬；胶质瘤
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| 关键词 ：
丹参酮ⅡA,
miR-124,
血清/糖皮质激素调节激酶1,
自噬,
胶质瘤
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| 基金资助:浙江省中医药科技计划项目（2024ZL784） |
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